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直射光与衍射光成像图
发表日期:2019/7/25       点击:259
摘要:
相差光路及成像示意图
相差板安装在相差物镜后焦面位置。相差板分为两部分,一是通过直射光的 部分,叫共轭面,通常呈环状;另一部分是绕过衍射光的部分,叫补偿面,位于 共扼面的内外两侧。相差板上装有吸取膜及推迟相位的相位膜。相差板除推迟直 射光或衍射光的相位以外,还有吸取光使光度发生变化的作用。
合轴调中望远镜,它是相差显微镜专用合轴工具,只有当聚光镜下面的环状 光环与相差物镜中的相位环完全准确重合时,才算完全处于相差状态。否则将会 引起低反差。有的多功能研究显微镜,不用拔掉目镜,直接转动伯特^透镜调节 钮即可合轴。
3.操纵步驟
(1) .将视场光栅完全打开。
(2) 将标本像调到聚焦点位置。
(3) 合轴调整:从低倍开始,先用10 x物境,同时转动聚光器转盘,使环
实验29几种研究用显微镜技术
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状光栅处f 10 X位置。拔出目镜,插入合轴调中望远镜,一边观察,一边旋转 望远镜头上的调节旋钮,直至能看到清晰的亮环和暗色圆环为止。此时不要动显 微镜的调焦部位。如果两环的中心不合轴,轻轻转动在聚光镜下两侧的调中旋 钮,使两环达到同心。如图7-17所示。
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图747相差光环的中心调节示意图
合轴调整从低倍到高倍逐一进行,最后取下望远镜,换上观察目镜,按普通 显微镜的方法观察即可。注意当更换物镜的倍数时,要再进行合轴调节。一次完 成合轴后,一般来说,再使用另外的环状光栅时,就不需要更多次地调中心了。 如果用于精确的观察及照相,则要求每次改变放大倍数时再重新调节。
二、倒置显微镜(Inverted microscope)
这种显微镜物镜、聚光镜和光源的位置均颠倒过来,故称为“倒置显微镜” 如图7-18所示。主要用于生物学中的组织及原生质体培养、浮游生物检验以及 流质沉淀物等观察和研究。
可将在培养皿或培养瓶中的活体标本直接放置在载物台上,进行显微观察和显微镜技术
研究,因此就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离要长。有的标本要求有 超长工作距离的聚光镜。
研究用倒置显微镜需配有5~ 100 x平场高度消色差物镜;其工作距离可大 于70_,常配广视场高眼点补偿10x目镜。由于被检物体多为无色透明的活 体,因此还附有其他装置如恒温控制箱、相差、微分干涉、荧光、偏光、显微操 作器、热台等附件,根据不同的镜检要求可快速切换。别的再配有高分辨率数字 收罗系统等,可获取高质量活体的动态图像。
三、焚光显微镜(Fluorescence microscope)
1.原理
荧光显微镜是用人眼不可见的较短波长光照射被检测物,使样品受到激发, 产生人眼可见的波长较长的荧光,可用来观察和分辨样品中产生荧光的身分和位 置。基本原理如图7-19所示。

激镜激镜
收色收色 吸滤吸滤 择光装光 选发内发
图7-19落射式荧光原理图
实验29几种研究用显微镜技术
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荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源,经过滤色系统,发出一定波长 的光作为激发光,能激发标本的荧光物质使其发出一定的荧光,通过物镜和目镜 的放大进行观察。在具有强烈反差的背景下,即使荧光很微弱也容易清晰辨认、 灵敏度高。

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