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荧光显微镜和普通光学显微镜基本相同
发表日期:2019/7/25       点击:344
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结构及性能
荧光显微镜和普通光学显微镜基本相同,主要区别是荧光显微镜具有荧光光 源和滤色系统。
⑴荧光光源常用高压萊灯做突光激发源。汞灯有50W、100W、200W等。
(2)滤色系统由激发滤光片和阻断滤光片组成。激发滤光片放置于光源和 物镜之间,其作用是选择激发光和波长范围。阻断滤光片多接纳长波通滤片。其 作用是吸取和阻挡激发光进入目镜,防止激发光干扰荧光和损伤眼睛,并可选择 通过特异的荧光,从而表现出专一性的荧光色彩。目前研究用显微镜的滤色系统 根据所需激发波长,大多将激发滤片和阻挡滤片装在一组装置中。
3. 使用方法
(1) 打开灯源,超高压汞灯要预热几分钟稳定后才能达到最佳状态。
(2) 根据使用显微镜的种类(透射式还是落射式),选择所要求的激发滤片 和阻挡滤片。
(3) 首先用低倍镜观察,调整光源中心,使其位于整个照相光斑的中央。
(4) 放置标本,调焦后即可观察。
注意事项:
应在暗室内进行,点燃汞灯5~15min,稳定后进行观察。
由于激发光长时间的照射会发生荧光减弱或消失,所以操纵尽可能在短时间内进行, 暂时不观察时,及时用挡板阻挡激发光源照射标本。
荧光灯管寿命有限,标本应集中观察,以节省时间。
油浸,用无荧光油。
严格按操纵规程制作标本,防止灰尘及污物等污染样本。
用标准无荧光载片(约1_)及盖片(约0_17mm),用无色透明,无自发荣光的封裱
剂。
注意不要直接用肉眼看照明光,在载物台前上方有黄色折光板予以保护,以防紫外线 伤害眼睛。
电源应装置稳压器,否则电压不稳不仅会降低髙压水银汞灯的使用时间,而且也影响 镜检效果。关掉荧光灯电源后,需冷却15min后再重新启动。
四'微分干涉差显微镜(Differentia丨 Interference Contrast Microscope, DIC)
除了具有相差显微镜效果,可以观察无色透明物体及活体标本外,可以使图
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第七章显微镜技术
像反差增大,并产生三维立体图像,也具浮雕效果。 (1)原理、成像特性图7-20透射式微分干涉显
微镜成像原理图
微分干涉差显微镜(DIC)是利用偏光 干涉原理的一种显微镜。从起偏镜出来的 直线偏振光通过渥拉斯顿棱镜后,分成互 相垂直振动的两种直线偏振光,经聚光镜 折射后射向标本并发生切变(横向偏移 A)。两种光通过物镜后,与第二组渥拉斯 顿棱镜相吻合,由检偏镜发生干涉。把无 色透明的标本转换为明暗和颜色的变化、 而反差增强,如图7-20所示。主要应用于 无色透明的活细胞观察及照相。但要注意 检偏镜和起偏镜是横偏光镜,有方向性。

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